
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
豬胰腺腺泡上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
胰腺組織
生長特性
多數(shù)懸浮
細(xì)胞形態(tài)
呈葡萄樣聚集 單個腺泡呈球形。
分類
豬原代細(xì)胞
貨號
A01X2272
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常胰腺組織。
2) 細(xì)胞鑒定:亞甲藍(lán)染色。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:呈葡萄樣聚集,多數(shù)懸浮,單個腺泡呈球形。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
胰腺分為外分泌腺和腺兩部分。其中,外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。
腺泡主要由腺泡細(xì)胞構(gòu)成,與閏管相連,外有基膜,為典型的蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠水通道蛋白0(AQP-0)elisa檢測試劑盒
大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒
小鼠(SST)elisa檢測試劑盒
人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)elisa分析檢測試劑盒
組織EPHB3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
雞1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa檢測試劑盒
體液α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測試劑盒
小鼠肥大細(xì)胞類糜蛋白酶1(CMA1)elisa檢測試劑盒
大鼠Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)elisa檢測試劑盒
FLAG Tag標(biāo)簽(N端)抗體 FLAG Tag
GLIS2蛋白抗體 GLIS2
酶動力蛋白2抗體 Dynamin 2
鈉通道亞基β4抗體 SCN4B
毒蕈堿型乙酰膽堿受體M4抗體 CHRM4
二價金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 Dmt1
血管緊張素激活蛋白1抗體 ATP1
煙堿型乙酰膽堿受體ε抗體 CHRNE
RNA結(jié)合蛋白LIN28B抗體 LIN28B
SCY1樣蛋白3抗體 SCY1 like 3
炭疽菌抗體 Anthrax
類型染色單體凝聚蛋白4抗體 SCC4
甲狀腺受體相關(guān)蛋白復(fù)合物230樣蛋白抗體 MED12L
腱糖蛋白X抗體 TNXB
2號染色體開放閱讀框49抗體 C2orf49
9號染色體開放閱讀框131抗體 C9orf131
體液總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒
豬胰腺腺泡上皮細(xì)胞Rabbit Anti-Mouse IgG H&L / HRP
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白27抗體
IBD2; PRO1063; Protein sel-1 homolog 1; SE1L1_HUMAN; Sel 1 like protein; Sel 1 suppressor of lin 12 like; Sel-1L; SEL1 LIKE; Sel1l; SEL1LIKE; Suppressor of lin-12-like protein 1; TSA305; UNQ128; UNQ128/PRO1063.
豬胰腺腺泡上皮細(xì)胞
大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
NCI-H1930人小細(xì)胞肺癌
小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16B
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。