
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
豬肺微血管內皮細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
肺組織
生長特性
貼壁培養
細胞形態
上皮樣 多角形細胞
分類
豬原代細胞
貨號
A01X2252
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于實驗動物的正常肺組織。
2)細胞鑒定:CD31熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養。
推薦培養基
我們推薦使用 Delf原代內皮細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
細胞簡介:
肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,該屏障對于肺氣體交換,調節液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。它還具有代謝功能,可以執行一定的非呼吸功能。在肺損傷中,肺微血管內皮細胞是活性氧類的重要靶細胞之一。
在肺炎的發生過程中,神經體液介質和氧化劑作用于內皮細胞,使得細胞間隙滲透性增加,蛋白質由血液進入間質。細胞間隙滲透性的增加導致低氧血癥,出現呼吸窘迫綜合征和非心源性肺水腫。
公司正在出售的產品:
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大鼠CD30分子(CD30)elisa分析檢測試劑盒
CD30 ELISA Kit
人高爾基蛋白73(GP-73)elisa分析檢測試劑盒
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監理蛋白抗體 Anti-Supervillin
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膜相關的蛋白質HEM2抗體 Anti-NCKAP1/NAP125
鋅指蛋白321B抗體 Anti-ZNF312B/FEZF1
肝細胞核因子4γ抗體
HNF4 gamma
鋅指蛋白744抗體
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大鼠轉化受體電位陽離子通道亞家族M成員7(TRPM7)elisa檢測試劑盒
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LB培養基LB Broth 250g
原鈣粘附蛋白β1抗體
PCDHB1
源相互作用蛋白激酶4抗體
HIPK4
腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ) Anti-TNF beta
多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1 Anti-PARP1
環指蛋白3抗體 Anti-PCGF3/RNF3
多配體聚糖結合蛋白1抗體 Anti-Syntenin 1
Cy7標記的小鼠抗兔IgG H&L
豬肺微血管內皮細胞5HT ELISA Kit
人干擾素誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)elisa分析檢測試劑盒
CHN 1; A-chimaerin; Alpha-chimerin; Alpha chimerin; ARHGAP2; CHIN_HUMAN; CHN; Chn1; N chimaerin; N chimerin; N-chimaerin; N-chimerin; NC; Rho GTPase-activating protein 2; RHOGAP2.
豬肺微血管內皮細胞
大鼠肝卵圓細胞
NCC-StC-K140人胃癌細胞
人正常肝細胞;QSG-770
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。