
培養方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養)后迅速置于的培養皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養瓶底壁上; 每個25ml的培養瓶中可接種20塊左右。

⑤培養:將培養瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態,繼續置37 ℃恒溫箱靜放培養。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養。
產品名稱
羊主動脈平滑肌細胞
產品規格
5×105cells/T25細胞培養瓶
組織來源
主動脈組織
生長特性
貼壁培養
細胞形態
長梭形、不規則細胞
分類
羊原代細胞
貨號
A01X2294
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形、不規則細胞,貼壁培養。
推薦培養基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細胞培養體系 作為體外培養的培養基。
細胞簡介:
血管發生和發展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞( smooth muscle cells, SMCs)轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管的原因 。因此,對血管平滑肌細胞的體外培養和研究可用來發現和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產品:
雞HSP60抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
大鼠清淀粉樣蛋白P(SAP)elisa檢測試劑盒
轉氫酶-2試劑盒
人血管緊張素II-1型受體(AT1R)elisa檢測試劑盒
稻米類植酸比色法定量檢測試劑盒
緊密連接蛋白2抗體 Anti-TJP2
視網膜色素上皮細胞特異性蛋白65抗體 Anti-RPE65
核受體輔助抑制因子1抗體 Anti-NCoR1
玻璃粘連蛋白抗體 Anti-VTN/Vitronectin
腦啡肽A抗體 PENK(237-258)
鳥苷酸環化酶激活因子2B抗體 GUCA2B
FITM1蛋白抗體 FITM1
GDAP1L1蛋白抗體 GDAP1L1
氧固醇結合蛋白樣6抗體 OSBPL6
乙醇脫氫酶5抗體 ADH5
動力蛋白激活蛋白1抗體 DCTN1/DAP-150
耳聾常染色體顯性遺傳相關蛋白3抗體 DIAPH3
源盒轉錄因子8抗體 HOXD8
拓普西異構酶Ⅰ抗體 Topoisomerase I
RNA結合蛋白28抗體 RBM28
SCAPER蛋白抗體 SCAPER
6號染色體開放閱讀框70抗體 C6orf70
ABL2蛋白抗體 ABL2
甲狀旁腺功能亢進蛋白2/細胞分裂周期73抗體 HRPT2
角蛋白相關蛋白KAP22.1抗體 KAP22.1
植物磷脂酶D(Phospholipase D)總活性熒光定量檢測試劑盒
羊主動脈平滑肌細胞Rabbit Anti-Monkey IgG H&L / APC
FAM101A蛋白抗體
N-Methyl-d-Asprtate receptor epsilon 1; Glutamate Receptor Ionotropic N Methyl D Aspartate epsilon-1; N Methly D Aspartate Receptor Channel Subunit Epsilon 1; NMDZ1_HUMAN.
羊主動脈平滑肌細胞
大鼠肝星狀細胞
MRK-nu-1人乳腺癌細胞
人眼脈絡黑色瘤細胞; c918 (STR)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養基重懸,置于培養箱培養。