
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
小鼠主動脈弓平滑肌細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1789
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2) 細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代內皮細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
血管發(fā)生和發(fā)展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞( smooth
muscle cells, SMCs)轉變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管的原因
。
因此,對血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產品:
Kim-1ELISAKit
大鼠補體蛋白3(C3)elisa分析檢測試劑盒
C3 ELISA Kit
人極低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析檢測試劑盒
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大鼠腺病毒抗體(FL/K87-Ab)elisa檢測試劑盒
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大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導劑(sTWEAK)elisa檢測試劑盒
NADH氧化還原酶輔酶2抗體
NDUFA2
γ氨基丁酸受體相關蛋白樣3抗體
GABARAPL3
硫氧還蛋白11抗體 Anti-TXNDC11
前列腺素E2抗體 Anti-PGE2
眼部白化病相關蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體 Anti-OA1/GPR143
5-脂氧合酶抗體 Anti-5 lipoxygenase
Cy5標記的兔抗人IgG H&L
小鼠主動脈弓平滑肌細胞Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5.5
FBN3蛋白抗體
MAJN; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1 (12 kDa TGF beta1 induced antiapoptotic factor); 12 kDa TGF-beta-1-induced antiapoptotic factor; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1; TGFB1-induced anti-apoptotic factor 1; TIAF1_HUMAN; MAJN; SPR210; MYO18A; MYSPDZ; TGFB1 induced anti apoptotic factor 1.
小鼠主動脈弓平滑肌細胞
大鼠骨髓間充質干細胞
Lu-143人小細胞肺癌細胞
人舌鱗癌細胞;UPCI:SCC152
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。