
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠脂肪血管基質(zhì)細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
脂肪組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1926
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常脂肪組織。
2)細胞鑒定: CD44熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代基質(zhì)細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
脂肪血管基質(zhì)組分( stromal vascular fraction,SVF)即脂肪組織去除成熟脂肪細胞后,所獲得的具有干
公司正在出售的產(chǎn)品:
人肝細胞生長因子激活物(HGFA)elisa分析檢測試劑盒
黃體**素(LH)elisa分析檢測試劑盒
細胞丙二醛(MDA)比色法定量檢測試劑盒
小鼠骨鈣素(BGP)elisa檢測試劑盒
大鼠白介素17(IL-17)elisa檢測試劑盒
大鼠胰島素樣因子3(INSL3)elisa檢測試劑盒
石蠟切片組織CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)elisa檢測試劑盒
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒
FA83D蛋白抗體 FA83D
FasL(CD178)抗體 Fas Ligand
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 phospho-AMPK alpha-1 (Thr183)
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體 phospho-ATG4A (Ser100)
代謝型谷氨酸受體1A抗體 GRM1
蛋白賴氨酸-6-氧化酶抗體 LOX
鋅指蛋白639抗體 ZNF639
信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2抗體 WD SOCS box protein 2
PE標記人CD5單克隆抗體 human CD5/PE
PTCD2蛋白抗體 PTCD2
受體表達蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體 REEP5
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek11抗體 NEK11
活化T細胞核因子5蛋白抗體 NFAT5
肌肉特異性蛋白MYOZ2抗體 Myozenin 2
組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體 JMJD2A
22號染色體開放閱讀框25抗體 C22orf25
組織乙酰化組蛋白H4染色質(zhì)沉淀分析(CHIP)試劑盒
小鼠脂肪血管基質(zhì)細胞Mouse Anti-Human IgG H&L (3D3) mAb / PE
信號傳導T細胞活化相關(guān)蛋白抗體
GTP binding protein RAY; GTP-binding protein RAY; H ray; RAB1C; Rab35; RAB35 member RAS oncogene family; RAB35, member RAS oncogene family; RAB35_HUMAN; Ras related protein rab 1c (GTP binding protein ray); Ras related protein Rab 1C; Ras related protein Rab35; Ras-related protein Rab-1C; Ras-related protein Rab-35; RAY.
小鼠脂肪血管基質(zhì)細胞
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞
Lu-134-B人小細胞肺癌細胞
人前列腺癌細胞;MDA-PCA-2B
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。