
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形、不規(guī)則細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1270
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于人的正常主動脈組織。
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形、不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
主動脈瓣施半月瓣,位于左心室和主動脈之間,抑制射入主動脈的血液回流入左心室。主動脈瓣鈣化可引起主動脈瓣狹窄關(guān)閉不全等,施導(dǎo)致老年退行性心瓣膜病的重要病理改變,其發(fā)病率隨著年齡的增加而升高。
有研究表明,瓣膜間質(zhì)細(xì)胞向城固細(xì)胞樣細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化有可能是主動脈瓣膜鈣化的病理改變基礎(chǔ)之一。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞樣品氧化酶表達(dá)組織化學(xué)檢測試劑盒
膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T
細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒
冰凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
牛1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
保幼3(JH3)含量測試盒
小鼠精氨酸加壓素受體1B(AVPR1B)elisa檢測試劑盒
趨化因子結(jié)合蛋白2抗體 CCBP2
熱休克因子結(jié)合蛋白1樣蛋白1抗體 HSBP1L1
Histone H3.3重組兔單克隆抗體 Histone H3.3
kappa型受體抗體 kappa Opioid receptor
造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 Prominin 2
整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 CD11b
富含亮氨酸重復(fù)蛋白6抗體 LRRC6
鈣粘蛋白14抗體 FAT4
細(xì)胞角蛋白75抗體 KRT75
細(xì)胞衰老抑制基因抗體 RSL1D1
T細(xì)胞調(diào)控相關(guān)蛋白抗體 CRTAM
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體 A4GNT
APC-Cy7標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體 mouse CD62L/APC-Cy7
ATP依賴RNA解旋酶DDX42抗體 DDX42
凱爾血型糖蛋白CD238抗體 CD238
老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS2抗體 CLSTN2
茶葉維生素U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測試劑盒
人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞Goat IgG / AF647
G蛋白γ13/Gγ13 抗體
IL2 Receptor gamma; IL2R gamma; IL 2R gamma; IL-2 receptor gamma precursor; IL2 Receptor gamma; CD132; CD 132; common cytokine receptor gamma chain; Gamma C; gamma(c); IL-2R gamma chain; IL2RG; IMD4; interleukin 2 receptor, gamma; P64; SCIDX; SCIDX1; Cytokine receptor common subunit gamma; Gamma C; gammaC; IL-2 receptor subunit gamma; IL-2R subunit gamma; IL-2RG; IL2RG_HUMAN; Interleukin-2 receptor subunit gamma; p64; SCIDX; SCIDX1.
人主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
RKO-E6人結(jié)腸癌細(xì)胞
RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。