產(chǎn)品名稱
人成骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
顱骨組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1423
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
人成骨細(xì)胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護(hù)和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人成骨細(xì)胞采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人成骨細(xì)胞經(jīng)ALP染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠甲狀旁腺(PTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
飲料精（arginine）含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
人體hTERT基因甲基化檢測(cè)試劑盒
壓片暗盒 個(gè)
核突觸蛋白α+β抗體 Anti-alpha + beta Synuclein
RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 Anti-RPUSD2
軸索過度生長抑制因子B受體抗體 Anti-NGBR/Nogo B receptor
鋅指蛋白81抗體 Anti-ZNF81
豬瘟病毒E2抗體 CSFV E2
轉(zhuǎn)錄因子MAFK抗體 MAFK
胱抑素8/半胱氨酸蛋白酶抑制劑8抗體 CST8
核呼吸因子2抗體 GABPB2
MYC結(jié)合蛋白2抗體 MYCBP2
Nogo-66(1-40)抗體 NEP1-40
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員F1抗體 SLC35F1
肽/天蠶肽抗體 Cecropin-A
CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 CUEDC2
DNA復(fù)制抑制因子抗體 Geminin
磷酸化氨基末端激酶1抗體 phospho-JNK1 (Thr183)
磷酸化谷氨酸受體2抗體 phospho-Gria2 (Ser880)
半乳糖凝集素10抗體 Galectin 10
丙型肝炎病毒E1抗體 Hepatitis C virus subtype 1b E1
線粒體核糖體蛋白L45抗體 MRPL45
鋅指蛋白365抗體 ZNF365
大鼠內(nèi)(ET)elisa檢測(cè)試劑盒
人成骨細(xì)胞長春堿含量測(cè)試盒
人干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)elisa分析檢測(cè)試劑盒
ADP ribosyltransferase 3; ART 3; Art3; Ecto-ADP-ribosyltransferase 3; FLJ26404; mono ADP ribosyltransferase; Mono(ADP-ribosyl)transferase 3; NAD(P)(+)--arginine ADP-ribosyltransferase 3; NAR3_HUMAN; TMART.
人肺成纖維細(xì)胞
小鼠食管平滑肌細(xì)胞
HULEC-5a人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
CAKI-2人腎透明細(xì)胞癌