產品名稱：MEF(絲裂霉素C處理)細胞

綜合微生物的培養方法，包括以下步驟：

（1）前期準備：（A）處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設備和材料；

（2）按比例配制培養材料；

（3）導入曝氣，進行繁殖培養；

（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養；

（5）分離并檢測；

（6）取液儲存；通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強，培養的綜合微生物均在3代以內，菌類穩定不發生突變，且繁殖快速。

使用范圍：

（1）合成培養基。合成培養基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚，組成成分，重復性強，而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏（Czapek）培養基等。 

（2）天然培養基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養霉菌，后者用于培養**。這類培養基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養豐富，培養效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分，如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。 

培養及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復培養：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養基，滴入安瓿管內，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養基試管中，并在建議的條件下培養。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環境下，某些菌種經過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續兩次繼代培養才能正常生長

4、復蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復蘇后需保藏的斜面應于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養保藏法

又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等（后者作保藏厭氧**用），培養后于4-6℃冰箱內保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當的載體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染并傳代，此法相當于一般微生物的傳代培養保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

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