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HRP底物氨乙基咔唑操作步驟
日期:2025-04-20 06:38
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摘要:
氨乙基咔唑(AEC)產生紅色產物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反應產生較高背景或要求改變產物顏色的實驗。此產物可溶于醇,但不溶于水。
1、需要的溶液和特殊設備
0.4% AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2),過氧化氫, Gelvatol或Mowiol,光學顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結果)。
2、 操作步驟
(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩定,因此,可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用;
(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液...
氨乙基咔唑(AEC)產生紅色產物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反應產生較高背景或要求改變產物顏色的實驗。此產物可溶于醇,但不溶于水。
1、需要的溶液和特殊設備
0.4% AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2),過氧化氫, Gelvatol或Mowiol,光學顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結果)。
2、 操作步驟
(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩定,因此,可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用;
(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH5.2)中,并攪拌;
(3) 加0.15 mL 3%過氧化氫于水中。過氧化氫一般是30%的溶液提供,在4℃可存放1個月;
(4) 用濾紙過濾;
(5) 加此溶液到標本中,并于室溫孵育10~40 min,水洗終止反應;
(6) 優化:如果需要復染,只可用水溶性染料;
(7) 用Gelvatol或Mowiol封片。