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新聞詳情
細胞培養操作步驟
日期：2025-04-20 02:23
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摘要：
培養操作:
1、復蘇細胞：
將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第2天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：
如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1）. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2）. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶...
培養操作:
1、復蘇細胞：
將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第2天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：
如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1）. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2）. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3). 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4). 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。