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大鼠白介素5elisa試劑盒測(cè)定步驟

日期:2025-04-20 07:05
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摘要:大鼠白介素5elisa試劑盒

大鼠白介素5elisa試劑盒測(cè)定步驟:

1.包被;

2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔);

3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。

4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘;

5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml;

6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值。

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